Mimicry between HTLV-I and myelin basic protein: No response in HTLV-I-associated myelopathy patients

The reactivity to a peptide from the HTLV-I polyprotein (FKLPGLNSR) and a similar sequence from myelin basic protein (MBP) (FKLGGRDSR) was examined in relation to the proposal that mimicry of MBP by HTLV-I could be involved in autoimmune responses in HTLV-I-associated myelopathy (HAM). It was found that rabbit antibodies raised against the HTLV-I peptide recognised both peptides, with a titre of 1/10240 to the HTLV-I peptide and 1/5220 to the MBP peptide. Human sera from HAM patients and a HTLV-I carrier without HAM showed slightly higher responses to the HTLV-I peptide compared to the responses from uninfected human sera. HAM patients had greater responses to the HTLV-I peptide than to the similar MBP peptide and an unrelated bovine MBP peptide. There was no recognition of the peptides by peripheral blood lymphocytes from HAM patients or a HTLV-I carrier without HAM. It was concluded that although cross-reactivity was demonstrated in rabbits and the HTLV-I peptide was recognised by sera from HAM patients, the epitope does not appear to evoke a mimicking response to the similar region in MBP. Hence it is not likely to be involved in the pathogenesis of HAM through molecular mimicry.

Serological Evidence of HTLV-I and HTLV-II Coinfections in HIV-1 Positive Patients in Belém, State of Pará, Brazil

ABSTRACT: The occurrence of HTLV-I/II and HIV-1 coinfections have been shown to be frequent, probably in consequence of their similar modes of transmission. This paper presents the prevalence of coinfection of HTLV among HIV-1 infected and AIDS patients in Belém, State of Pará, Brazil. A group of 149 patients attending the AIDS Reference Unit of the State Department of Health was tested for the presence of antibodies to HTLV-I/II using an enzyme immunoassay and the positive reactions were confirmed with a Western blot that discriminates between HTLV-I and HTLV-II infections. Four patients (2.7%) were positive to HTLV-I, seven (4.7%) to HTLV-II and one (0.7%) showed an indeterminate pattern of reaction. The present results show for the first time in Belém not only the occurrence of HTLV-II/HIV-1 coinfections but also a higher prevalence of HTLV-II in relation to HTLV-I. Furthermore, it also enlarges the geographical limits of the endemic area for HTLV-II in the Amazon region of Brazil.

Infection of donor lymphocytes with human T lymphotrophic virus type 1 (HTLV-I) following allogeneic bone marrow transplantation for HTLV-I positive adult T-cell leukaemia

Human T lymphotrophic virus type 1 (HTLV-I) associated leukaemia has a poor prognosis even with chemotherapy. We describe a patient with adult T-cell leukaemia treated with allogeneic bone marrow transplantation from an HTLV-I negative identical sibling donor. During follow-up after bone marrow transplantation, HTLV-I could be repeatedly isolated inspite of anti-viral prophylaxis. The patient died of an acute encephalitis and HTLV-I could be detected in autopsy material from the brain. By a PCR-based technique using short tandem repeats (STRs) it was shown that the patient's haemopoiesis was of donor origin. This shows the infection of donor cells in vivo by an aetiological agent which has been implicated in the leukaemogenic process for adult T-cell leukaemia.

Búsqueda de anticuerpos y provirus de HTLV-I

Tesis (Maestría en Ciencias con especialidad en Microbio logía) U.A.N.L.

Avaliação clínica de doadores de sangue portadores do vírus linfotrópico de células T humanas (HTLV - I/II)

Os vírus linfotrópicos de células T humanas do tipo I e II (HTLV-I/II) são retrovírus que podem ser transmitidos por transfusão de sangue. Estes vírus estão associados com paraparesia espástica tropical (PET), leucemia/linfoma de células T do adulto (L/LTA) e outras doenças sistêmicas imunomediadas. O presente estudo teve como objetivo investigar sinais clínicos de patologias associadas a esses vírus para utilizar na triagem clinica de candidatos à doação de sangue. Usou procedimentos padronizados para avaliação clinica de 30 doadores de sangue soropositivos para HTLV-I/II confirmados pela técnica de reação em cadeia da polimerase (PCR) matriculados no ambulatório do Núcleo de Medicina Tropical da UFPA. Paralelamente, através de interrogatório clínico complementar, estudou grupo controle com 40 candidatos à doação de sangue escolhidos aleatoriamente, que tiveram resultados sorológicos negativos. Dos 30 pacientes examinados, verificou-se que 23 eram portadores de HTLV-I e 07 HTLV-II. Na avaliação clínica, 15 pacientes (50%) não referiram queixas, sendo que 12 pacientes com queixas exclusivamente neurológicas. Observou 05 pacientes com formigamentos; 05 com diminuição da força muscular; 04 com constipação intestinal; 02 com parestesia; 02 com nódulos subcutâneos; 01 com incontinência urinária; 01 com visão borrada; 01 com diminuição do libido. No grupo controle, 05 candidatos (12,5%) referiram queixas. Os resultados indicam que diminuição da força muscular e formigamento devem ser questionados na triagem clínica prévia à doação de sangue para reduzir risco de infecção transfusional.

HTLV-I associated myelopathy in the northern region of Brazil (Belém-Pará): serological and clinical features of three cases

Três pacientes (masculinos, negros, idades 37, 40 e 57) foram atendidos em uma clínica universitária com uma paraparesia progressiva de origem obscura. Um paciente que referiu a duração da doença por mais de 16 anos, mostrou hiporreflexia, sinal de Babinski bilateral, uma sensibilidade vibratória diminuída, disfunção urinária e dor lombar. Os outros dois pacientes (com um e seis anos de duração da doença) queixavam-se de fraqueza em uma das pernas, hiperreflexia e lombalgia. Sinal de Babinski e distúrbio urinário estavam também presentes no paciente com seis anos de doença. Amostras de sangue testadas por ELISA e Western blot foram positivos para HTLV-I. A análise familiar de um dos pacientes, mostrou um possível padrão de transmissão sexual e vertical do vírus. Ao nosso conhecimento, estes são os primeiros casos comprovados de uma provável associação entre o HTLV-I e PET/MAH em Belém, Pará, e enfatiza a necessidade de uma busca ativa de casos de doenças neurológicas associadas ao vírus na região.

Prevalence of human T cell leukemia virus-I (HTLV-I) antibody among populations living in the Amazon region of Brazil (preliminary report)

Prevalence of human T cell leukemia virus-I (HTLV-I) antibody among populations living in the Amazon region of Brazil (preliminary report)NakauchiC. M.LinharesA. C.MaruyamaK.KanzakiL. I.MacedoJ. E.AzevedoV. N.CassebJ. S. R. Fundação Serviços de Saúde Pública, Seção de Vírus, Instituto Evandro Chagas Belém Brasil Chiba Cancer Research Institute, Department of Pathology Chiba Japan Universidade Federal do Pará Belém Brasil Instituto Offir Loyola Belém Brasil Faculdade Estadual de Medicina Belém Brasil 0319908512933Forty-tree (31.4%) out of 137 serum samples obtained from two Indian communities living in the Amazon region were found to be positive for HTLV-I antibody, as tested by enzyme-linked immunosorbent assay (Elisa). Eighty-two sera were collected from Mekranoiti Indians, yielding 39% of positivity, whereas 11 (20.0%) or the 55 Tiriyo serum samples had antibody to HTLV-I. In addition, positive results occurred in 10 (23.2%) out of 43 sera obtained from patients living in the Belem area, who were suffering from cancer affecting different organs. Five (16.7%) out of 30 Elisa positive specimens were also shown to be positive by either Western blot analysis (WB) or indirect immunogold electron microscopy (IIG-EM).

Prevalence of HTLV-I antibody among two distinct ethnic groups inhabiting the Amazon region of Brazil

Soroprevalências para HTLV-I de 3,63% (02/55), 12,9% (10/82) e 13,88% (10/72) foram demonstradas entre os Tiryió, Mekranoiti e Xicrin, respectivamente - indígenas habitantes da Amazônia -, utilizando-se a técnica de "Western Blot" (WBEI). Por outro lado, a imunomicroscopia eletrônica indireta (IIME) revelou como positivos 2 Tiryió, 9 Mekranoiti e 6 Xicrins. Das 44 amostras de soro oriundas de migrantes japoneses, nenhuma resultou positiva pelas duas técnicas antes mencionadas. Foram reativos por ambos os métodos, 1, 8 e 6 amostras dos índios Tiryió, Mekranoiti e Xicrin, respectivamente. Nossos resultados representam uma forte evidência de que o HTV-I e/ou variante(s) antigenicamente similar(es) circula(m) entre populações que habitam a região amazônica do Brasil.

Human Endogenous Retrovirus K(HML-2) Gag and Env specific T-cell responses are not detected in HTLV-I-infected subjects using standard peptide screening methods

Abstract Background An estimated 10–20 million individuals are infected with the retrovirus human T-cell leukemia virus type 1 (HTLV-1). While the majority of these individuals remain asymptomatic, 0.3-4% develop a neurodegenerative inflammatory disease, termed HTLV-1-associated myelopathy/tropical spastic paraparesis (HAM/TSP). HAM/TSP results in the progressive demyelination of the central nervous system and is a differential diagnosis of multiple sclerosis (MS). The etiology of HAM/TSP is unclear, but evidence points to a role for CNS-inflitrating T-cells in pathogenesis. Recently, the HTLV-1-Tax protein has been shown to induce transcription of the human endogenous retrovirus (HERV) families W, H and K. Intriguingly, numerous studies have implicated these same HERV families in MS, though this association remains controversial. Results Here, we explore the hypothesis that HTLV-1-infection results in the induction of HERV antigen expression and the elicitation of HERV-specific T-cells responses which, in turn, may be reactive against neurons and other tissues. PBMC from 15 HTLV-1-infected subjects, 5 of whom presented with HAM/TSP, were comprehensively screened for T-cell responses to overlapping peptides spanning HERV-K(HML-2) Gag and Env. In addition, we screened for responses to peptides derived from diverse HERV families, selected based on predicted binding to predicted optimal epitopes. We observed a lack of responses to each of these peptide sets. Conclusions Thus, although the limited scope of our screening prevents us from conclusively disproving our hypothesis, the current study does not provide data supporting a role for HERV-specific T-cell responses in HTLV-1 associated immunopathology.

Anti-HLA I antibodies induce VEGF production by endothelial cells, which increases proliferation and paracellular permeability

Anti-human leukocyte antigen class I (HLA I) antibodies were shown to activate several protein kinases in endothelial cells (ECs), which induces proliferation and cell survival. An important phenomenon in antibody-mediated rejection is the occurrence of interstitial edema. We investigated the effect of anti-HLA I antibodies on endothelial proliferation and permeability, as one possible underlying mechanism of edema formation. HLA I antibodies increased the permeability of cultured ECs isolated from umbilical veins. Anti-HLA I antibodies induced the production of vascular endothelial growth factor (VEGF) by ECs, which activated VEGF receptor 2 (VEGFR2) in an autocrine manner. Activated VEGFR2 led to a c-Src-dependent phosphorylation of vascular endothelial (VE)-cadherin and its degradation. Aberrant VE-cadherin expression resulted in impaired adherens junctions, which might lead to increased endothelial permeability. This effect was only observed after cross-linking of HLA I molecules by intact antibodies. Furthermore, our results suggest that increased endothelial proliferation following anti-HLA I treatment occurs via autocrine VEGFR2 activation. Our data indicate the ability of anti-HLA I to induce VEGF production in ECs. Transactivation of VEGFR2 leads to increased EC proliferation and paracellular permeability. The autocrine effect of VEGF on endothelial permeability might be an explanation for the formation of interstitial edema after transplantation.

HLA alleles determine human T-lymphotropic virus-I (HTLV-I) proviral load and the risk of HTLV-I-associated myelopathy

The risk of disease associated with persistent virus infections such as HIV-I, hepatitis B and C, and human T-lymphotropic virus-I (HTLV-I) is strongly determined by the virus load. However, it is not known whether a persistent class I HLA-restricted antiviral cytotoxic T lymphocyte (CTL) response reduces viral load and is therefore beneficial or causes tissue damage and contributes to disease pathogenesis. HTLV-I-associated myelopathy (HAM/TSP) patients have a high virus load compared with asymptomatic HTLV-I carriers. We hypothesized that HLA alleles control HTLV-I provirus load and thus influence susceptibility to HAM/TSP. Here we show that, after infection with HTLV-I, the class I allele HLA-A*02 halves the odds of HAM/TSP (P < 0.0001), preventing 28% of potential cases of HAM/TSP. Furthermore, HLA-A*02+ healthy HTLV-I carriers have a proviral load one-third that (P = 0.014) of HLA-A*02− HTLV-I carriers. An association of HLA-DRB1*0101 with disease susceptibility also was identified, which doubled the odds of HAM/TSP in the absence of the protective effect of HLA-A*02. These data have implications for other persistent virus infections in which virus load is associated with prognosis and imply that an efficient antiviral CTL response can reduce virus load and so prevent disease in persistent virus infections.

Clonagem e expressão da glicoproteína transmembrana do vírus linfotrópico de células T humanas em sistema procarioto

HTLV-1 is the virus that causes T cell lymphoma/leukemia in adults and a neurological disorder known as HTLV-associated myelopathy or tropical spastic paraparesis. One of the transmission means is through contaminated blood and its byproducts. Because of the risk of HTLV-associated infections, screening for HTLV was introduced for Brazilian blood donors in 1993. Most of the diagnostic kits used in the national blood banks are bought from foreign companies. Brazil does not have the technology to produce this material and there is a need to produce diagnostic systems with national technology. In this study, we show the expression of gp21/HTLV-1 in Escherichia coli and its reactivity towards monoclonal antibodies and the antibodies of infected patients. Expressing these proteins is the first step towards obtaining diagnostic kits with Brazilian biotechnology.

Prevalência de anticorpos para HTLV em indivíduos atendidos em um centro de diagnóstico para Anti-HIV

As pesquisas relativas às infecções pelos vírus HTLV I e II têm crescido nos últimos anos, com o advento da Síndrome da Imunodeficiência Adquirida, por também ser causada por um retrovírus. E, ainda, em caso de co-infecção, a AIDS tem maior precocidade em seu desenvolvimento com modificações, inclusive, dos parâmetros de acompanhamento e início de terapêutica antiretroviral. Devido a isto, foi feito um estudo com o objetivo de determinar a soroprevalência de Anti-HTLV I e II na comunidade que procura um Centro de Testagem de Anti-HIV. Foram obtidas amostras sangüíneas de 588 usuários da Unidade de Referência Especializada em Doenças Infecciosas e Parasitárias (URE-DIPE), além de 292 usuários do Instituto Evandro Chagas (IEC) e 295 doadores de sangue do Centro Hemoterápico do Pará (HEMOPA). Foram utilizados os métodos de ELISA em duplicata e Western Blot. Na URE-DIPE, o heterossexual foi a categoria de exposição predominante na procura de testagem Anti-HIV, em ambos os sexos, com 499 pessoas (84,9 %), entretanto, após análise dos resultados de Anti-HTLV, não houve diferença significante nas amostras soropositivas de indivíduos heterossexuais comparando com os homossexuais, demonstrando que a vulnerabilidade está presente independente da opção sexual. A soropositividade foi constatada em 7 usuários (1,2 %), com detecção exclusiva do Anti-HTLV I. A co-infecção HTLV/HIV ocorreu em 3 casos, correspondendo a 0,5 % do total estudado. No IEC, a soropositividade foi encontrada em 2 casos (0,7 %) de Anti-HTLV I e II. Comparando estes dois grupos (URE-DIPE e IEC), os resultados não foram discordantes, com p = 0.2345 e 0.4691, respectivamente. A faixa etária de maior atividade sexual foi a mais acometida. Não houve registro de soropositividade nos doadores de sangue do HEMOPA. Conclui-se que os resultados obtidos na URE-DIPE e Instituto Evandro Chagas não permitem definir que, na primeira, ocorrem mais casos de infecção pelo HTL V, além de não haver predomínio entre as categorias de exposição; portanto, a exposição sexual é o fator dominante. A faixa etária acometida favorece a transmissão vertical. A ausência de soropositividade nos doadores de sangue é compatível com a baixa prevalência deste grupo, de acordo com a literatura. Há necessidade de maior divulgação sobre o HTLV aos profissionais de saúde e população em geral para que medidas de prevenção e controle possam ser efetivadas.

Detection of HTLV-IIa in blood donors in an urban area of the Amazon Region of Brazil (Belém, PA)

Os vírus linfotrópicos de células T humanas tipo I (HTLV-I) e tipo II (HTLV-II) são membros de um grupo de retrovírus de mamíferos com propriedades biológicas similares que apresentam como uma das principais rotas de transmissão a transfusão sangüínea. O HTLV-I é endêmico em diferentes áreas geográficas e está associado a vários distúrbios clínicos. O HTLV-II é endêmico em vários grupos indígenas das Américas e em usuários de drogas intravenosas na América do Norte e do Sul, Europa e Sudeste da Ásia. Durante o ano de 1995, todos os doadores de sangue positivos para HTLV-I/II no Banco de Sangue do Estado (HEMOPA), foram direcionados a um médico e ao Laboratório de Virologia na Universidade Federal do Pará, para consulta, aconselhamento e confirmação do diagnóstico laboratorial. Trinta e cinco soros foram testados por um ensaio imunoenzimático e confirmados por um Western blot que discrimina as infecções por HTLV-I e HTLV-II. Amostras soropositivas para HTLV-II foram submetidas à reação em cadeia da polimerase (PCR) para as regiões genômicas env e pX e confirmaram ser do subtipo IIa. Esta é a primeira detecção, em Belém, da presença da infecção pelo HTLV-IIa em doadores de sangue. Estes resultados enfatizam que o HTLV-II está presente em áreas urbanas da região Amazônica e a necessidade de incluir testes de triagem capazes de detectar anticorpos para ambos os tipos de HTLV.